半岛彩票:涂布棒_试剂标物-仪器信息网

　　平板涂布玻璃珠X-GalSolution平板涂布玻璃珠提供了一种高效快速的菌液（大肠杆菌、酵母菌液等）涂布方法。平板涂布玻璃珠（直径4mm）光滑均匀，无菌包装，表面经特殊工艺处理，不残留菌液。与传统方法比较，使用平板涂布玻璃珠，菌液涂布更加均匀，并能够覆盖传统涂菌方法不能达到的平板边缘。同时，可实现多板同时涂布，大大提高实验效率。平板涂布玻璃珠可经反复灭菌，多次使用特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

　　平板涂布玻璃珠英文名称：运输：常温保存：常温有效期：5年货期：1-2天其他：产品介绍：使用方法1.将50-300mg昆虫组织放入10-15mL塑料离心管中，加入1mL溶液A，然后用匀浆器匀浆5-20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎昆虫组织，砚磨完后加入1mL溶液A。注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。2.将匀浆物或砚磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。3.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备氯仿，在振荡器上振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。4.室温12,000rmp离心3-5分钟，两相间将有约5-10毫米厚的细胞破碎物。5.将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。好留下100uL上清液不取。6.加入等体积的溶液C，充分颠倒混匀。7.将一半的溶液转移到离心吸附柱中，12,000rmp室温离心半分钟，弃穿透液。8.将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中，12,000rmp室温离心半分钟，弃穿透液。9.加0.7mL通用洗柱液，室温12,000rmp离心半分钟，弃穿透液。10.加0.3mL通用洗柱液，室温12,000rmp离心半分钟，弃穿透液。此步可以省略。11.室温12,000rmp离心半分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的使用。12.将离心吸附柱转移到RNase-free收集管中，加入50-100uLRNA洗脱液，室温放置1-2分钟。13.12,000rmp室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。14.RNA完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子（BioTechniques，28：414，2000）。注意：大部分昆虫的28SRNA被切割成两个小的片段，彼此用氢键相连，所以在甲醛变性胶中，没有28S带出现（文献见：EvaC.Winnebeck，CraigD.MillarandGuyR.Warman，WhydoesinsectRNAlookdegradedJournalofInsectScience:Vol.10：1-7）15.RNA产量产率测定：将5-10μLRNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度（1OD260的RNA=40μg/mL），进而计算出RNA的产量（浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。16.RNA纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

　　pTRCmob棒状杆菌表达质粒基本信息质粒简介pTRCmob棒状杆菌表达质粒质粒图谱扩增流程收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒；②取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）③加入500μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；④取10μl、100μl复苏液，并分别涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）⑤将平板正向培养1h，再倒置

　　pBMTBX-3棒状杆菌表达质粒基本信息质粒简介pBMTBX-3棒状杆菌表达质粒质粒图谱扩增流程收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒；②取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）③加入500μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；④取10μl、100μl复苏液，并分别涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）⑤将平板正向培养1h，再倒置37度培养16h。如果要求是30度则培养

　　棒状杆菌表达质粒基本信息别名:pECXK99E质粒简介pEC-XK99E棒状杆菌表达质粒质粒图谱扩增流程收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒；②取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）③加入500μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；④取10μl、100μl复苏液，并分别涂布至目标质粒抗性的LB

　　mEos3.2-Tubulin-C-18人源基因质粒质粒图谱扩增流程收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒；②取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）③加入500μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；④取10μl、100μl复苏液，并分别涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）⑤将平板正向培养1h，再倒置37度培养16h。如果要求是30度则培养20h；（如果菌落过多，请将质粒稀释后再转化。如果无菌落，请加入10μl质粒离心全涂转化）⑥挑取单菌落至LB

　　Turbo感受态细胞产品说明NEBTurbo感受态细胞非常适合于高效转化和快速生长。基因型为FproA+B+lacIq?lacZM15/fhuA2?(lac-proAB)glnVgalK16galE15R(zgb-210::Tn10)TetSendA1thi-1?(hsdS-mcrB)5。产品特点1.转化效率高达1-3×109cfu/μgpUC19DNA。2.通过lacIq精确控制表达，从而允许克隆潜在的毒性基因。3.转化后最快6.5小时后可以在琼脂糖平板得到可见菌落。4.缺失非特异性核酸内切酶I（endA1）活性，可用于制备高质量质粒。5.可做蓝白斑实验。6.携带AmpR的质粒可以5分钟完成转化实验。7.挑取过夜培养的单菌落，培养4小时即进行DNA提取。操作步骤方案一：高效转化方案1.取感受态细胞置于冰浴中，放置10分钟。2.向感受态细胞中加入1-5μl含有1pg-100ng的质粒DNA，轻轻地敲打4-5下。3.冰浴30分钟，不要震荡。4.42℃热击30秒，不要震荡，迅速转移到冰浴中，放置5分钟。5.加入950μl室温的SOC培养基。6.混匀后，置于37℃的摇床上，250rpm震荡培养60min。7.将含有抗生素的平板加热到37℃，放置半个小时，使其表面干燥，易于均匀涂布。8.根据实验要求，取适量转化的感受态的细胞，加到含有抗生素的固体琼脂糖培养基上（LB或SOC），用无菌棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃培养箱，倒置过夜培养（8-12h）。方案二：五分钟转化方案1.取感受态细胞置于冰浴中，放置10分钟。2.向感受态细胞中加入1-5μl含有1pg-100ng的质粒DNA，轻轻地敲打4-5下。3.冰浴2分钟，不要震荡。4.42℃热击30秒，不要震荡，迅速转移到冰浴中，放置2分钟。、5.加入950μl室温的SOC培养基，迅速将50-100μl加到含有抗生素的固体琼脂糖培养基上（LB或SOC），用无菌棒将细胞均匀涂开，将平板置于37-42℃培养箱，倒置过夜培养（8-12h）。注意：除阿莫西林以外的抗生素需要一段时间生长才能涂布到有抗生素的固体琼脂糖培养基上。运输和储藏干冰运输，收到后请置于-80℃。注意：感受态细胞应置于-80℃，-20℃会显著降低转化活性。感受态细胞处于-80℃以上，即使不融化，也会降低转化活性。热门展示无菌滑石粉nissle1917金葡萄球菌枯草芽孢杆菌金葡萄球菌大肠埃希氏菌白色念珠菌血平皿（9cm）大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌

　　pTRE2hyg-Stuffer哺乳调控质粒基本信息质粒分类:哺乳细胞载体；四环素调控系统质粒质粒图谱扩增流程收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒；②取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）③加入500μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；④取10μl、100μl复苏液，并分别涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）⑤将平板正向培养1h，再倒置37

　　细胞名称人膀胱移行细胞癌；UM-UC-3形态特性上皮样；多角生长特性贴壁生长特征特性培养条件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)优质胎牛血清，10%传代方法消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。传代情况PN冻存条件完全培养基+8%DMSO产品名称人膀胱移行细胞癌；UM-UC-3说明书生长特性贴壁生长货号CS-X6877细胞培养操作规程：主要功能：（1）血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。（2）表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1，参与血管壁的炎症反应。（3）与血管疾病的进展和稳定有关。生理变化：（1）主动脉硬化。（2）主动脉瘤（3）主动脉钙化。一般培养方法:1、组织块培养法A）按照前述方法取材，将组织剪成或切成1mm3大小的小块，并加入少许培养基使组织湿润。B）人膀胱移行细胞癌；UM-UC-3说明书将小块均匀涂布于瓶壁，每小块间距0.2cm～12.5px，一般在25mL培养瓶（底面积为437.5px2）可接种20～30小块为宜，小块放置后，轻轻翻转培养瓶，使瓶底朝上，然后于瓶内加入适量培养基盖好瓶塞，将瓶倾斜放置在37℃温箱内。C）培养2～4小时，待小块贴附后，将培养瓶缓慢翻转平放，静置培养，动作要轻，严禁摇动和来回振荡，以防由于冲动而使小块漂起而造成培养失。